首页 > 中国老年学杂志 > 荧光报告系统验证 miR－142－5p 的靶基因 Becn1

荧光报告系统验证 miR－142－5p 的靶基因 Becn1

二维码有效期 120s

摘要目的：验证 miR－142－5p 的靶基因———自噬相关基因 Becn1。方法生物信息学预测 miR－142－5p 与 Becn1的结合位点，构建含有结合位点的 Becn1基因3＇UTR 野生型和突变型质粒，将重组质粒与 miR－142－5p－mimics 或 miR－NC 共转染 C2C12细胞，检测荧光素酶活性。结果miR－142－5p 与 Becn1的3＇UTR存在一个结合位点（123～129）；成功构建野生型重组质粒 pGL3－Becn1－3＇UTR 和靶位点含3个碱基突变的重组质粒 Mut－3＇UTR；与共转染 pGL3－Becn1－3＇UTR 和 miR－NC 组相比，共转染 pGL3－Becn1－3＇UTR 和 miR－142－5p－mimics 组荧光素酶活性显著下降，约为41.2％（ P＜0.01）；而与对照组相比，共转染 Mut－3＇UTR 和 miR－142－5p－mimics 组的荧光素酶活性下降不明显（P＞0.05）。结论初步验证自噬相关基因 Becn1是miR－142－5p 的靶基因。

作者阮杰 ^[1] 黄池荣 ^[2] 刘桂平 ^[2] 梁国辉 ^[2] 张健 ^[2] 刘新光 ^[1] 学术成果认领

作者单位广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东医学院医学检验学院; 广东省医学分子诊断重点实验室 ^[1] 广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东医学院医学检验学院 ^[2]

关键词 miR-142-5p MicroRNA Becn1 基因 3'非编码区(3'UTR)荧光素酶报告质粒

医学主题词基因(Genes)质粒(Plasmids)荧光素(Fluorescein)荧光(Fluorescence)转染(Transfection)

分类号 R34（人体生物化学、分子生物学）

栏目名称

基础研究

DOI 10.3969/j.issn.1005-9202.2016.06.002

发布时间 2016-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（No.81170327）广东省医学科研基金（No.A2014470）东莞市科技计划（No.2012108102022）东莞市科技计划（201410515200159）广东医学院科研项目（XK1412）广东医学院科研项目（ZZDC006）广东医学院科研项目（ZZDC009）广东医学院科研项目（STIF201102）