摘要目的 研究异甘草素对顺铂诱导的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E衰老模型的作用及其机制.方法 通过顺铂诱导建立NRK-52E细胞衰老模型:CCK-8法检测不同浓度顺铂处理对NRK-52E细胞活力的影响,β半乳糖苷酶染色检测刺激后细胞衰老水平,实时定量PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测衰老相关炎性因子改变,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色检测细胞凋亡水平.综合以上多种检测指标后确定顺铂最佳处理剂量.并进一步在建立的细胞衰老模型基础上研究异甘草素的作用:将细胞分为正常对照组、顺铂刺激组、不同剂量异甘草素处理组(5、10、15μmol/L).检测药物处理后对细胞增殖、凋亡、衰老等的影响,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的改变.结果 与NC组相比,不同浓度的顺铂均能显著抑制细胞活性,增加细胞衰老程度,促进衰老相关多个炎症因子的分泌,且顺铂浓度为4μmol/L时具有典型的衰老指征,因此,选用其作为后续造模调节;异甘草素处理后,β半乳糖苷酶染色显示衰老细胞数量明显减少,衰老相关炎症因子表达减少,细胞内ROS水平显著降低.结论 通过顺铂诱导法可成功建立NRK-52E细胞衰老模型,异甘草素处理可明显改善顺铂诱导的NRK-52E细胞衰老,抑制凋亡,其机制可能与降低ROS水平有关.
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