调节神经元CREB磷酸化水平对APP和γ分泌酶的影响

Effect of regulating the phosphorylation level of CREB on APP and secre-tase γ

二维码有效期 120s

摘要目的在人神经元样细胞SY5Y中激活和抑制环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化,检测γ分泌酶复合体蛋白及β淀粉样蛋白前体(APP)水平的变化,分析通过调控CREB磷酸化防治阿尔茨海默病(AD)的可行性.方法培养空载体SY5Y细胞(Vector-SY5Y)、过表达Gαq(Gαq-SY5Y)细胞、过表达APP(APP-SY5Y)细胞,分别用cAMP激动剂Forskolin、蛋白激酶(PK)A受体抑制剂H 892HCL处理上述3种细胞,Western印迹检测APP及γ分泌酶复合体的蛋白成分早老素增强子(PEN2)及早老素C端(PS1-CTF)的水平变化.结果 ①在Vector-SY5Y细胞中,激动剂组APP的表达无明显变化,PEN2、PS1-CTF表达明显上调;抑制剂组APP的表达明显上调,PEN2、PS1-CTF变化不明显.②在Gαq-SY5Y细胞中,激动剂组APP明显下降,PEN2表达量明显上调,PS1-CTF明显下降;抑制剂组APP明显下降,PEN2明显下调,PS1-CTF无明显变化.③在APP-SY5Y细胞中,激动剂组APP变化不明显,PEN2表达明显上调,PS1-CTF表达明显下降;抑制剂组APP明显上升,PEN2表达明显下降,PS1-CTF明显上调.结论激活CREB的磷酸化可上调γ分泌酶复合体中PEN2水平,协同过表达Gαq可明显降低APP水平,可设计基于CREB和Gαq的AD防治策略.