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蓬子菜总黄酮通过LncRNA TPTEP1/miR-770-5p对高糖诱导足细胞损伤的影响及其机制

摘要目的 探讨蓬子菜总黄酮(FGVL)对高糖诱导足细胞损伤的影响及其可能作用机制.方法 采用高糖诱导小鼠足细胞建立细胞损伤模型,不同浓度的FGVL处理足细胞,用脂质体转染法将pcDNA、pcDNA-TPTEP1 转染至足细胞后用25 mmol/L葡萄糖处理24 h,用脂质体转染法将si-NC、si-TPTEP1 转染至足细胞后用200 μg/ml FGVL与25 mmol/L葡萄糖处理24 h;用试剂盒检测丙二醛(MDA)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TPTEP1、miR-770-5p的水平;双荧光素酶报告实验验证TPTEP1 与 miR-770-5p的靶向关系;Western印迹检测肾病蛋白(nephrin)、足突蛋白(podocin)、突触极蛋白(synaptopodin)、酶切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase)-3、Cleaved Caspase-9 蛋白表达量.结果 FGVL可明显降低高糖诱导的足细胞中miR-770-5p表达量和MDA水平(P<0.05),并可明显降低细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 蛋白水平(P<0.05),而细胞存活率和SOD、CAT活性明显升高(P<0.05),TPTEP1 表达量和nephrin、podocin、synap-topodin蛋白表达明显升高(P<0.05);TPTEP1 可靶向调控miR-770-5p表达;转染pcDNA-TPTEP1 后高糖诱导的足细胞中miR-770-5p表达量和MDA的水平明显降低,细胞凋亡率明显下降,Cleaved Caspase-3 及Cleaved Caspase-9 蛋白表达明显下降,细胞存活率和SOD、CAT活性明显升高,nephrin、podocin、synaptopodin 蛋白表达明显升高(均 P<0.05);转染 si-TPTEP1 可逆转FGVL对高糖诱导的足细胞增殖、凋亡和氧化应激反应.结论 FGVL能有效调控细胞增殖与各项氧化反应,其有效调控TPTEP1/miR-770-5p表达是其发挥调控作用的基础,因此有效改善因高糖引起的足细胞受损.

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分类号 R587.1
栏目名称 基础研究
DOI 10.3969/j.issn.1005-9202.2023.16.041
发布时间 2023-08-29
基金项目
江西省卫生计生委科技计划项目
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中国老年学杂志

2023年43卷16期

3991-3996页

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