沉默长链非编码RNA ANO1-AS1对食管鳞癌细胞迁移、侵袭的影响
Effect of long non-coding RNA ANO1-AS1 silencing on migration and in-vasion of esophageal squamous cell carcinoma cells
摘要目的 研究长链非编码(Lnc)RNA ANO1-AS1 对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制.方法 食管癌细胞株(EC109、TE)转染ANO1-AS1 敲减慢病毒,沉默ANO1-AS1 表达为LV-sh-ANO1-AS1 组,阴性肿瘤对照为LV-Con组,未进行转染为空白对照(Blank)组.通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组食管癌细胞中ANO1-AS1 和ANO1 的相对表达量.通过划痕实验和Transwell迁移实验检测各组细胞的迁移能力.通过Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力.通过Western印迹测定每组细胞中ANO1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、上皮间质转化(EMT)相关蛋白及细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达.结果 qRT-PCR结果显示,转染ANO1-AS1 敲减慢病毒后,食管癌细胞EC109、TE中LV-sh-ANO1-AS1 组LncRNA ANO1-AS1 和ANO1 mRNA表达水平均显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05).划痕实验结果表明,LV-sh-ANO1-AS1 组细胞划痕愈合率显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05).Transwell结果表明,LV-sh-ANO1-AS1 组细胞迁移和侵袭能力显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05).West-ern印迹结果显示,与LV-Con组和Blank组比较,LV-sh-ANO1-AS1 组MMP2、MMP9、Vimentin、p-ERK及ANO1 蛋白表达水平显著降低,E-cadherin 蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论 LncRNA ANO1-AS1 在食管鳞癌细胞EC109、TE中高表达,并可能通过影响ERK/MAPK信号通路促进食管癌细胞的迁移和侵袭.
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