摘要目的 探讨老年小鼠缺血组织中骨髓(BM)源性CD11b+巨噬细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)-A165b抑制老年小鼠新血管形成的作用机制.方法 制备 8 周龄小鼠(对照组)和>72 周龄小鼠(观察组)后肢缺血模型,每组 6 只,分别于术前、术后第 0、4、7、14 天用激光散斑血流成像(LSBFI)评估血流恢复状态.采用免疫组织化学染色方法于术后第 4 天,对巨噬细胞(Mac-3)进行染色,计算巨噬细胞数量,于第 14 天对CD31+巨噬细胞进行染色检测两组缺血后肢肌肉中毛细血管密度.采用Western印迹,于术后第 4 天检测两组缺血肌肉组织中VEGF-A、丝氨酸精氨酸蛋白剪接因子(SC35)、Wnt5a蛋白表达水平.采用实时荧光聚合酶链反应(RT-qPCR)于术后第 4 天检测两组缺血肌肉组织中BM源性CD11b+巨噬细胞裂解物及缺血肌肉中VEGF-A165b、Wnt5a mRNA水平.采用含有观察组BM源性CD11b+巨噬细胞的特殊培养液在缺氧条件下培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24 h,计算每个板口的 6 个区域中出芽数量和长度评估CD11b+巨噬细胞分泌的VEGF对血管生成的影响.结果 LSBFI显示,观察组后肢缺血呈现低灌注信号(深蓝色),而对照组呈现高灌注信号(红色).与对照组相比,观察组缺血后肢肌肉中毛细血管密度明显降低(P<0.05).与对照组相比,观察组缺血肌肉组织中VEGF-A、SC35、Wnt5a蛋白表达水平明显升高,观察组BM源性CD11b+巨噬细胞中及缺血肌肉组织中VEGF-A165b、Wnt5a mRNA表达水平明显升高(P<0.05).HUVEC芽的数量和长度,与不含有观察组小鼠BM源性的CD11b+巨噬细胞的培养液相比,其生长明显受到抑制(P<0.05).结论 衰老可通过VEGF-A165b机制损害缺氧组织的新血管形成,其机制可能由Wnt5a-SC35 信号通路介导.