摘要目的 通过网络药理学和体外细胞实验,探究垂盆草保护急性肝损伤的有效成分及潜在的功能机制.方法 利用网络药理学和生物信息学预测垂盆草的有效成分、主要活性成分和靶点.800 μl的四氯化碳(CCl4)处理肝细胞Hep-aRG 2 h,构建肝细胞损伤模型;10 μmol/L异鼠李素或白细胞介素(IL)-17 信号通路激活剂SR0987 处理HepaRG细胞,再CCl4溶液培养 2 h.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝损伤生化指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH);细胞计数试剂盒(CCK8)、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡;逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western印迹检测IL-17 mRNA和蛋白表达.结果 中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TC-MID)分析垂盆草得到 5 种主要活性成分,302 个靶基因;疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET)、人类孟德尔遗传数据库(OMIM)分析肝损伤得到 398 个靶基因,与有效成分靶基因取交集,共有 177 个靶基因.通过对靶基因的京都基因组百科全书(KEGG)富集分析和基因本体论(GO)富集分析发现,IL-17 信号通路富集率和差异均最高.体外细胞实验表明,成功构建CCl4 诱导HepaRG细胞模型,模型细胞ALT、AST、LDH、MDH含量均显著升高,增殖率显著降低,凋亡率显著升高,IL-17 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05);异鼠李素处理后,这些指标的变化均得到抑制.SR0987 处理后明显减弱异鼠李素的作用.结论 垂盆草的主要活性成分异鼠李素通过抑制IL-17 信号通路的活性发挥肝保护作用.
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