换一批
换一批摘要目的 对小胶质细胞中胰岛素受体(InsR)表达进行抑制,探讨InsR对小胶质细胞生长稳态维系和功能的调节作用.方法 通过小分子干扰RNA(siRNA)技术,对BV-2细胞中的InsR转录进行抑制.采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术及酶联免疫吸附试验(ELISA)法,对InsR转录抑制后BV-2细胞中InsR基因和蛋白表达、Ccnd2基因表达转化生长因子(TGF)-β1、肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达及细胞活性、周期、凋亡情况进行检测.结果 3'-胆固醇修饰的InsR-siRNA转染24 h后,可明显抑制BV-2细胞中InsR的转录;转染48 h后,InsR蛋白表达显著下调,BV-2细胞的细胞活性明显降低,G1/S期细胞周期阻滞和细胞凋亡明显增加,Ccnd2基因表达和TGF-β1蛋白表达明显下调.结论 InsR对维系小胶质细胞的生长稳态及对小胶质细胞向M2型驱动和TGF-βl的表达具有重要作用,可对小胶质细胞本身和小胶质细胞维系的神经系统环境稳态及神经功能的作用产生重要影响.
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