换一批
换一批慢病毒干扰HDAC4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响及稳转株建立
Effects of interfering with HDAC4 expression through infecting lentiviral vectors on HT-22 mice neuronal apoptosis and construction of a stable transformation cell strain
摘要目的 观察慢病毒干扰组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响.方法 CCK-8法检测慢病毒感染后神经元细胞活性的变化;确定慢病毒载体感染最适感染复数(MOI);确定最适嘌呤霉素浓度;筛选干扰HDAC4表达效率最高序列,构建稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株;CCK-8法检测干扰HDAC4表达对神经元活性的影响;流式细胞术和Western印迹检测干扰HDAC4表达对神经元凋亡的影响.结果 慢病毒载体对神经元活性无显著影响;最适MOI为20;最适嘌呤霉素浓度为2 μg/ml;成功筛选稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株,干扰效率为71％;干扰HDAC4表达导致神经元活性降低和凋亡增加.结论 成功构建稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株,干扰HDAC4表达可导致HT-22神经元凋亡水平增加.
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关键词
慢病毒载体HT-22海马神经元组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4稳转株建立Lentiviral infectionHT-22 hippocampal neuronHistone deacetyltransferase(HDAC)4Stable transformation cell strain
分类号
R33
栏目名称
基础研究
DOI
10.3969/j.issn.1005-9202.2024.16.022
发布时间
2024-09-25
基金项目
国家自然科学基金
国家自然科学基金
贵州省卫生健康委科学技术基金项目
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