茯苓酸调节MLCK/mlC信号通路对创伤性脑损伤大鼠血脑屏障的影响

The effect of Poria acid on the blood-brain barrier in rats with traumatic brain injury by regulating the MLCK/mlC signaling pathway

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摘要目的探讨茯苓酸(PA)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠血脑屏障的影响及其可能的作用机制.方法采用改良版Feeney自由落体法建立TBI大鼠模型,将大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(TBI)组、PA(PA,100 mg/kg)组、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂(ML-7,1 mg/kg)组,每组20只.对大鼠进行神经功能缺损评分;干湿比重法测定脑组织含水量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织炎性因子水平;伊文思蓝(EB)染色评估血脑屏障通透性;免疫荧光染色观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达;Western印迹检测血脑屏障相关蛋白和MLCK/肌球蛋白轻链(mlC)通路相关蛋白表达.结果与Sham组比较,TBI组神经功能缺损评分、脑组织含水量、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6、EB水平、GFAP阳性细胞数、MLCK、p-MLC/mlC蛋白表达明显上升,ZO-1、Occludin蛋白表达明显下降(P＜0.05);与TBI组比较,PA组、ML-7组神经功能缺损评分、脑组织含水量、TNF-α、IL-1β和IL-6、EB水平、GFAP阳性细胞数、MLCK、p-MLC/mlC蛋白表达明显下降,ZO-1、Occludin、蛋白表达明显上升(P＜0.05);PA组与ML-7组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PA可以减轻TBI引起的血脑屏障功能障碍,其机制与抑制MLCK/mlC信号通路激活有关.