软骨损伤大鼠体内BMSC迁移

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摘要目的通过软骨损伤大鼠模型来明确骨髓间充质干细胞(BMSCs)在修复缺损时迁移过程.方法选取8周龄雄性SD大鼠24只,体质量220～250 g,双膝股骨滑车制造骨软骨损伤模型,术后立即向关节腔注射绿色荧光蛋白(GFP)-BMSCs,根据是否注射细胞分成两组:对照组为右膝注射20 μl生理盐水(n=3),实验组为右膝注射3x 106细胞20 μl(n=21).对照组在第7天取材,实验组分别在造模后的1～7 d取材.对取材后的双侧膝关节进行冰冻非脱钙骨切片,Hochest33258染色,荧光显微镜下观察表达绿色荧光BMSCs的分布部位.结果经过7 d对GFP-BMSCs的连续观察可以发现:第1天,GFP-BMSCs主要聚集在右膝缺损部位;第2天,分布在右膝骺板近端的骨小梁周围;第3天,细胞通过右膝骺板来到骨髓腔;第4天,细胞通过血液循环迁移到左膝骨髓腔及骺板远端,再经过1 d穿过骺板;第6天,细胞流向左膝的缺损部位;第7天,细胞更多地来到左膝缺损部位并分布在缺损周围软骨下骨板.结论通过向双膝骨软骨损伤的一侧(右侧)关节腔注射GFP-BMSCs后,成功观察到BMSCs在体内迁移过程,不仅能够迁移到右侧缺损部位,而且能够通过血液循环迁移到对侧(左侧)膝关节的缺损部位进行修复.