摘要目的 探究经β-抑制蛋白(β-arrestin)-2修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对肝硬化大鼠肠黏膜屏障功能与辅助性17细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡的影响及机制.方法 分离大鼠BMSCs并鉴定,采用携带β-arrestin-2基因的重组慢病毒及阴性对照重组慢病毒感染BMSCs,经倒置荧光显微镜、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western印迹测定转染效果;实验分为对照组、模型组、BMSCs组、β-arrestin-2-BMSCs组,除对照组外,其余3组根据四氯化碳(CCl4)联合乙醇复合法诱导构建大鼠肝硬化模型,BMSCs组尾静脉注射BMSCs(5×106个/只),β-arrestin-2-BMSCs组尾静脉注射β-arrestin-2修饰的BMSCs(5×106个/只).8 w后,利用全自动生化仪检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织和回肠组织形态改变,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠血清中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-10、IL-17及IL-23水平,流式细胞术测定外周血Th17/Treg免疫失衡情况,Western印迹测定肝组织内维甲酸相关核孤儿受体(ROR)γt与叉头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp)3蛋白表达.结果 分离的细胞大小均匀,呈典型的成纤维细胞样,具有向成脂和向成骨分化的能力,且细胞表面高表达CD29、CD44、CD90,低表达 CD34、CD45、HLA-DR,由此判断成功分离到 BMSCs;与 BMSCs 组和 NC-BMSCs 组比较,β-arrestin-2 组 β-arrestin-2 mRNA与蛋白表达量显著上调(P＜0.05),说明成功构建β-arrestin-2修饰的BMSCs.与模型组比较,BMSCs组和β-arrestin-2-BMSCs组血清中ALT与AST活性明显降低,肝小叶损坏得到缓解,炎性细胞浸润减少,回肠组织绒毛变形、坏死减少,血清TGF-β、IL-10含量明显升高,IL-17、IL-23含量明显降低,Th17细胞比例明显减少、Treg细胞比例明显增加,Th17/Treg比值明显下调,肝组织RORγt蛋白相对表达量明显降低,Foxp3蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05);此外,与BMSCs组比较,β-arrestin-2-BMSCs组血清中ALT与AST活性明显降低(P＜0.05),肝小叶和回肠组织结构较为完整,未见明显炎性细胞浸润,血清TGF-β、IL-10含量明显升高,IL-17、IL-23含量降低,Th17细胞比例明显减少,Treg细胞比例明显增加,Th17/Treg比值明显下调,肝组织RORγt蛋白相对表达量明显降低、Foxp3蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05).结论 经β-arrestin-2修饰的BMSCs治疗能够显著改善肝硬化大鼠的肝脏损伤与肠黏膜屏障功能,调节机体Th17/Treg免疫失衡,从而对肝硬化大鼠发挥保护作用.