miR-338-5p靶向Runx2对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡及成骨分化的影响
The Effect of MiR-338-5p on Proliferation,Apoptosis and Osteogenic Differentiation of Alveolar Bone Osteoblasts by Targeting Runx2
摘要目的:探究miR-338-5p靶向Runt-相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡及成骨分化的影响.方法:分离人牙槽骨成骨细胞,并对其进行转染.细胞分为过表达miR-338-5p组(miR-338-5p组)及其对照组(miR-NC组)、过表达Runx2组(Runx2组)及其对照组(NC组)、过表达miR-338-5p+Runx2组(miR-338-5p+Runx2组)及其对照组(miR-338-5p+NC组).双荧光素酶实验验证miR-338-5p对Runx2的调控作用;细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK-8)、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)染色检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡能力;碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)染色检测细胞成骨分化能力;RT-qPCR检测细胞miR-338-5p、Runx2 mRNA水平;Western Blot检测细胞Runx2、增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、ALP、骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)蛋白水平.结果:miR-338-5p靶向调控Runx2.过表达miR-338-5p后,细胞存活率、EdU阳性细胞率及成骨分化能力降低,细胞凋亡率升高,miR-338-5p、Bax蛋白水平升高,Runx2 mRNA和蛋白水平、PCNA、Ki67、Bcl-2、ALP、OCN、OPN蛋白水平降低(P<0.05);过表达Runx2后,细胞存活率、EdU阳性细胞率及成骨分化能力升高,细胞凋亡率降低,miR-338-5p、Bax蛋白水平降低,Runx2 mRNA和蛋白水平、PCNA、Ki67、Bcl-2、ALP、OCN、OPN蛋白水平升高(P<0.05);过表达Runx2能够减弱过表达miR-338-5p对细胞增殖、凋亡及成骨分化能力的影响(P<0.05).结论:miR-338-5p靶向Runx2表达抑制牙槽骨成骨细胞增殖和成骨分化能力,并促进细胞凋亡.
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