苍术素调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对恶性黑素瘤A375细胞的影响
Effects of Atractylotin on PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway on A375 Cells of Malignant Melanoma
摘要目的:探讨苍术素对恶性黑素瘤(Malignant melanoma,MM)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:体外培养A375细胞并分为对照组,苍术素低剂量组(苍术素-L组)、中剂量组(苍术素-M组)、高剂量组(苍术素-H组)(5、10、20 μmol/L)及苍术素-H组+740 Y-P[磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)激活剂]组(20 μmol/L苍术素+20 μmol/L 740 Y-P).分别以MTT法、细胞划痕实验、Transwell实验、流式细胞术、蛋白免疫印迹(Western blot)法筛选苍术素浓度、检测细胞迁移、侵袭、细胞凋亡、磷酸化(p-)PI3K、PI3K、p-蛋白激酶(Akt)、Akt、p-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、mTOR蛋白表达.结果:苍术素5、10、20 μmol/L剂量处理A375细胞显著降低细胞的增殖能力;苍术素-M组、H组较对照组细胞凋亡率升高、细胞迁移和侵袭能力及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平降低(P<0.05);苍术素-H+740 Y-P组较苍术素-H组细胞生长状态良好,凋亡率降低,细胞增殖、迁移和侵袭能力及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05).结论:苍术素可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制MM细胞恶性生物学行为.
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