全血标本采集和处理方法对后续试验的影响

AN ASSESSMENT OF THE IMPACT FACTORS FOR THE QUALITY OF WHOLE BLOOD SAMPLE DUETO COLLECTION AND STORAGE

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摘要目的探讨选择采集和储存血样标本的最佳方案,并讨论不同DNA提取方法的用途方向.方法分别用普通抗凝采血管和DNAgard Blood抗凝采血管采集静脉血5ml,放在室温下2d或-80℃下1周后采用试剂盒法和自配试剂法提取DNA.用核酸定量仪检测纯度和浓度,用凝胶电泳检查完整度,用PCR评估质量和对后续实验的影响.用x2检验对比不同收集方法、提取方法血样中DNA的效果和质量,并对比用于后续试验的结果.对比工作所消耗的责源和费用.结果二种方法在提取DNA效率上差异无统计学意义;用普通采血管室温放置2d,提取DNA为0;普通采血管-80℃冻存7d和用DNAgardBlood采血管室温放置7d,在DNA提取纯度和提取效率差异均无统计学意义.各种情况下采用二种方法提取的DNA完整性和对PCR试验结果无明显差异.在费用支出和适用强度上,若不计算冰箱储存费用,DNAgard Blood采血管购买价是普通抗凝采血管的10倍;若计算低温保存、运输、采血组织等费用,用DNAgard Blood采血管的总费用是普通采血管费用的50％.结论 DNAgard Blood采血管对全血中DNA有较好的保护作用,实用性好.在有冰箱设备的医院,用普通采血管更容易被接受.