换一批重组人截短型胰岛素样生长因子1在大肠杆菌中的高效表达
High-level expression of human truncated insulin-like growth factor 1 in E.coli
摘要目的:建立人截短型胰岛素样生长因子1的原核高效表达系统.方法:利用基因重组技术将人截短型胰岛素样生长因子1[Des(1-3)IGF1]的cDNA片段克隆到融合蛋白表达载体pMTY4中,用离子交换层析法纯化蛋白并经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射免疫检测、N-末端前16位氨基酸序列测定及生物活性检测等方法对所获蛋白进行了鉴定.结果:获得含人Des(1-3)IGF1基因的重组质粒,在大肠杆菌中高效表达出含凝血酶识别序列的MS2-Des(1-3)IGF1融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化后纯化可获得与天然型一致的人Des(1-3)IGF1.结论:该方法是获得人重组Des(1-3)IGF1的有效途径,对进一步研究Des(1-3)IGF1有重要意义.
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