换一批
换一批摘要目的：在人甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因中引入GGC54GAC点突变。方法：设计上下游引物和诱变引物，以汉族人野生型MBL cDNA为模板，采用megaprimer-PCR技术进行定点突变，将PCR产物克隆至pGEM-T载体，酶切和测序分析。结果：以上游引物和诱变引物进行第一轮PCR，获得一约180bp的DNA片段，以此片段和下游引物行第二轮PCR扩增，得到一长约780bp的产物；将其克隆至pGEM-T载体，酶切发现第54位密码中的BanI酶切位点已被破坏，与计算机酶切图谱分析结果一致；序列分析表明，除第54位密码变为GAC外，余与野生型MBL cDNA完全相同。结论：构建成功了GGC54GACMBL突变体，为深入探索MBL基因突变引起调理吞噬缺损的机制提供了分子病理模型。
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