换一批摘要目的:研究LPS刺激对肿瘤坏死因子转换酶(TACE)基因转录和表达的影响及其与TNF-α前体加工的关系.方法:采用Dot-blotting、Dot-ELISA、间接免疫荧光和FACS等方法分别检测HL-60细胞在LPS刺激的不同时间段TACE、TNF-α基因转录表达和膜分子分布情况.结果:①HL-60细胞构成性高表达有活性TACE,主要分布于细胞膜和核周边.②LPS刺激TNF-α基因转录表达,但由于TACE的作用,膜TNF-α(TM-TNF-α)下降,而分泌型TNF(sTNF-α)增加;TACE的反义寡核苷酸(ODN)显著抑制TNF-α这种前体转换作用.③LPS同样刺激TACE基因表达增加,而且TACE酶解作用增强,但其蛋白表达和膜分子分布反而下降,推测TACE在发挥其催化膜蛋白作用后,其分子结构形式发生改变.结论:炎症时分泌型TNF-α增加不仅是该细胞因子基因表达增高所致,更受到TACE基因表达水平和活性状态的约束.
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