换一批
换一批腺病毒介导HLA-B7可诱导启动子调控双细胞因子基因在人肝癌细胞中表达
Adenoviral vector-mediated transfer of huTNFα and huIFN β gene in human hepatocellular carcinoma cells controlled by HLA-B7 inducible promoter
摘要目的:使外源性TNF、IFN基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类(MHC Ⅰ)分子基因表达呈"正反馈"式放大效应.方法:以腺病毒为载体,以IRES连接TNF和IFN基因,选择HLA-B7可诱导启动子调控其表达.分别用RT-PCR、抗体中和实验和MTT法检测转导基因的转录及蛋白表达,流式细胞仪检测MHC Ⅰ类分子表达.结果:TNFα和IFNβ基因在人肝癌细胞中可有效转录,转染细胞(SMAdBT1、SMAdCTⅠ)的MHC Ⅰ类分子表达高于SMAd对照组,且SMAdBT1组明显高于SMAdCTI组.TWF最高活性:SMAdBTI和SMAd分别为1.059 ng/ml、415 pg/ml;IFN最高活性分别为298.57 U/24 h/106个细胞和262.26 U/24 h/106个细胞.抗TNFα多抗、抗IFNβ多抗对SMAdBTI、SMAdCTI上清均具有中和活性.结论:腺病毒介导的HLA-B7可诱导启动子调控的人TNFα和IFNβ基因导入人肝癌细胞株SMMC-7721,可明显增加其对TNF、IFN和MHCⅠ类分子的表达.
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栏目名称
肿瘤免疫学
发布时间
2004-05-28
基金项目
国家自然科学基金
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