银屑病患者骨髓HPP-CFC集落形成及p21基因启动子甲基化的研究
The study of the colony formation of HPP-CFC from bone marrow-derived hematopoietic cells of psoriatic patients and the methylation of p21 gene promotor in HPP-CFC
摘要目的:研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)集落形成能力及集落细胞p21基因启动子甲基化状态,探讨银屑病患者骨髓造血前体细胞的活性.方法:密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞,培养于含SCF+GM-CSF+IL-3+IL-6细胞因子组合的甲基纤维素半固体培养基,培养14天时计数HPP-CFC集落,然后收集集落.提取纯化集落细胞DNA,经亚硫酸盐修饰后,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测HPP-CFC集落细胞p21基因启动子甲基化状态.结果:(1)在甲基纤维素半固体培养基中,银屑病患者骨髓HPP-CFC集落数显著低于正常对照组,且集落形态较小;(2)正常对照骨髓HPP-CFC p21基因启动子甲基化阳性率较高,而银屑病患者骨髓HPP-CFC p21基因启动子甲基化阳性率低于正常对照组.结论:银屑病患者骨髓造血前体细胞活性有异常;银屑病患者骨髓HPP-CFC p21基因甲基化降低可能与其相对较低的HPP-CFC集落形成能力密切相关.
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