抗人DR5功能性单克隆抗体诱导Jurkat细胞凋亡的线粒体途径的分子机制
The mitochondrial-dependent molecular mechanisms for inducing apoptosis in Jurkat cells by a novel agonistic anti-human DR5 monoclonal antibody
摘要目的:探讨抗人死亡受体5(DRS)功能性单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞诱导凋亡的线粒体途径的分子机制.方法:MTT法检测单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞生长抑制作用的剂量-效果及时间-效果关系;JC-1单染流式细胞术定量分析技术对凋亡的Jurkat细胞线粒体膜电位的变化进行分析;免疫印迹技术检测凋亡细胞的Caspase-8、3、9及Bid、Bax、Bcl-2、Cyto c等凋亡相关蛋白的表达情况.结果:mDRA-6对Jurkat细胞抑制具有明显剂量-效果和时间-效果关系;流式细胞仪检测显示,2.0μg,/ml浓度的mDRA-6作用15、30、60和120分钟时,Jurkat细胞线粒体膜电位改变率分别为20.14%、19.34%、21.11%、30.90%,呈逐渐增高趋势.免疫印迹技术检测显示,mDRA-6作用后,Jurkat细胞Caspase-8、9及Bid、Bax、Bcl-2、Cyto c等表达活性增加,并且Cyto C在线粒体内为递减而在胞浆呈递增的表达现象.结论:mDRA-6通过激活外源性膜受体,继而启动细胞线粒体途径导致Jurkat细胞凋亡.本研究为mDRA-6对白血病治疗奠定实验基础.
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