固相MICA协同s4-1BBL、IL-15体外高效扩增CD3+CD56+细胞的研究
High expansion of CD3 and CD56 double positive cells with immobilized MHC class Ⅰ chain-related protein A,soluble 4-1BBL,and IL-15 in vivo
摘要目的:观察固相MHC Ⅰ类相关抗原A(iMICA)是否协同s4-1BBL、IL-15促进外周血CD3+CD56+细胞的增殖并增强其活性.方法:首先将iMICA联合s4-1BBL、IL-15分别刺激外周血单个核细胞或纯化的CD3+CD56+细胞,共培养19天,动态观察CD3+CD56+细胞频率变化及记录其增殖曲线;其次利用LDH释放法和ELISA分别检测长期培养的CD3+CD56+细胞杀伤活性及IFN-?、IL-4的分泌;最后检测CD3+CD56+细胞表面活性相关受体的表达.结果:iMICA 联合s4-1BBL、IL-15促进CD3+CD56+细胞的频率自2%升高至21.7%,绝对细胞数平均增长32倍;扩增后的CD3+CD56+细胞杀伤K562活性明显增高,IFN-?分泌能力增强,不分泌IL-4;其表面活化性受体表达上调,抑制性受体表达下调.结论:iMICA联合s4-1BBL、IL-15能高效扩增CD3+CD56+细胞,体外大量增殖后可用于肿瘤的过继免疫治疗.
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