换一批小鼠肺间质树突状细胞的分离、纯化与鉴定
The separation,purification and identification of mouse interstitial dendritic cells in lung
摘要目的:建立肺间质树突状细胞(DCs)的分离与纯化方法,为肺间质DCs的相关研究提供实验基础.方法:雄性BALB/c小鼠肺组织经Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心、CD11c+免疫磁珠分选纯化DCs,流式细胞术鉴定分选DCs纯度,倒置相差显微镜观察孵育细胞生长状态,扫描电镜和透射电镜观察DCs超微形态,流式细胞术检测肺间质DCs的CD11c、CD11b、CD86和I-Ab表型.结果:分选获得的肺间质DCs经鉴定,纯度为92.59%±5.62%,在RPMI1640培养基中生长状态良好,少数细胞形成小细胞集落.DCs超微形态观察显示细胞表面多见长1～2 μm密集的树枝状突起,细胞器不发达,细胞核形不规则.90%以上肺间质DCs为未成熟状态或前体DCs,低表达成熟标志物I-Ab和CD86,并具有异质性,近40%起源于髓系细胞分化.结论:密度梯度离心和免疫磁珠分选是分离、纯化肺间质DCs的理想方法,获得的DCs纯度高、活性好、免疫表型稳定,但操作步骤比较复杂,技术要求高.
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分类号
R364.7（病理学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-484X.2011.09.012
发布时间
2011-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81000848）
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