重组IFN-α-IL-18体外对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB的影响

Effects of recombinant IFN-α-IL-18 on chicken lymphocyte transformation and NF-κB activity in vitro

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摘要目的：：探讨鸡IFN-α-IL-18融合蛋白对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB( NF-κB）的影响。方法：构建重组酵母表达质粒pPICZ-IFN-α、pPICZ-IL-18和pPICZ-IFN-α-IL-18，电转化酵母菌X-33后以1％甲醇诱导，SDS-PAGE和Western blot鉴定表达IFN-α、IL-18及IFN-α-IL-18蛋白，淋巴细胞转化试验初步检测表达产物生物学活性，双抗体夹心法测定不同时段淋巴细胞中总NF-κB和细胞核中NF-κB的含量。结果：酵母培养上清液中存在分子量分别为22、23和43 kD的目的蛋白；表达的IFN-α-IL-18和IL-18均能明显促进鸡外周血淋巴细胞转化(P＜0.05），IFN-α对淋巴细胞转化有促进作用，但总体差异不显著(P＞0.05）。与对照组相比，经IFN-α-IL-18和IL-18作用的鸡淋巴细胞中总NF-κB含量明显增加(P＜0.05），细胞核中NF-κB含量差异极显著(P＜0.01），IFN-α作用的淋巴细胞中总NF-κB含量与对照组相比差异不显著(P＞0.05），细胞核中NF-κB含量显著增加(P＜0.05）。结论：IFN-α-IL-18及IL-18能够明显促进淋巴细胞转化，IFN-α促进淋巴细胞转化活性较弱，这种促淋转机制与NF-κB的表达、活化及核质转运有关，为进一步研究IFN-α-IL-18融合蛋白的功能及其在疫病防控中的作用奠定了基础。