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首页 > 中国免疫学杂志 > FILIP-1 L 蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

FILIP-1 L 蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

Prokaryotic expression of FILIP-1 L and preparation of its polyclonal antibody

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学术成果认领

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摘要目的：表达、纯化GST-FILIP-1L融合蛋白，制备FILIP-1L多克隆抗体。方法：pGEX-4T3-FILIP-1L重组质粒转化E． coliBL21大肠杆菌，IPTG诱导GST-FILIP-1L融合蛋白表达，Glutathion Sepharse 4B纯化GST-FILIP-1L融合蛋白。将纯化的GST-FILIP-1L融合蛋白免疫新西兰大耳白兔，制备FILIP-1L多克隆抗体，用ELISA方法检测多克隆抗体效价，Western blot检测多克隆抗体与FILIP-1L蛋白、细胞转染FILIP-1L蛋白及细胞FILIP-1L蛋白的结合能力。结果：在大肠杆菌中诱导出高表达的FILIP-1L融合蛋白，经Glutathion Sepharse 4B纯化后免疫新西兰大耳白兔，获得了高效价的抗FILIP-1L多克隆抗体，亲和层析获得纯度较高的多克隆抗体，WB检测显示多克隆抗体能够与FILIP-1L蛋白、293细胞转染FILIP-1L蛋白及肝癌细胞FILIP-1L蛋白结合。结论：成功表达、纯化了GST-FILIP-1L融合蛋白，制备了高效价的抗FILIP-1L多克隆抗体，为研究FILIP-1L蛋白生物学功能提供了有用的实验工具。

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作者都景芳 ^[1] 顿国庆 ^[1] 张舒曼 ^[1] 褚留杰 ^[1] 李淑莲 ^[1] 胡延忠 ^[1] 马远方 ^[1] 学术成果认领

作者单位抗体药物河南省工程实验室，河南大学医学院细胞与分子免疫学实验室，开封 475004 ^[1]

关键词 FILIP-1L 融合蛋白多克隆抗体 Filamin A interacting protein 1-like Fusion protein Polyclonal antibody

主题词蛋白(Egg White)抗体(Antibodies)细胞(Cells)方法(Methods)大肠杆菌(Escherichia coli)

分类号 R392

栏目名称 免疫学技术与方法

DOI 10.3969/j.issn.1000-484X.2016.06.014

发布时间 2016-06-23

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2016年32卷6期

832-837页

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