换一批酵母表面展示多肽片段分析Δ42 PD1的免疫原性
Analysis of immunogenicity ofΔ42PD1 via yeast surface displaying peptide frag-ments
摘要目的：分析Δ42PD1胞外区的免疫原性。方法：将Δ42PD1胞外区编码基因分为6个片段，分别用PCR的方法进行扩增，并克隆至酵母表面展示质粒pCTCON2。分别将重组酵母表达质粒转化酵母细胞，涂布SDCAA平板，挑取单细胞克隆于SGCAA培养基中诱导目的基因的表达。通过肌肉注射Δ42PD1真核表达质粒加局部电穿孔的方法免疫BALB／c小鼠，制备鼠抗人Δ42PD1免疫血清。用流式细胞术的方法分析免疫血清与酵母表面展示的Δ42PD1多肽片段的结合。结果：PCR扩增的Δ42PD1的6个片段的编码序列全长均110 bp，核酸序列分析显示克隆的目的基因与GenBank中已经登记的PD1基因序列100％同源；流式细胞术的结果发现酵母表面展示的Δ42PD1的F3和F2片段可与Δ42PD1的免疫血清发生明显结合。结论：Δ42PD1的F3和F2片段是该分子的免疫优势区域，为制备Δ42PD1的单克隆抗体及表位筛选奠定了基础。
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关键词
程序性细胞死亡受体1Delta-42程序性细胞死亡受体1酵母表面展示免疫原性流式细胞术PD1Δ42PD1Yeast surface displayImmunogenicityFlowcytometry
医学主题词
免疫(Immunity)性(Sex)程序性细胞死亡受体1(Programmed Cell Death 1 Receptor)流式细胞术(Flow Cytometry)方法(Methods)
分类号
R392.11（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-484X.2016.09.019
发布时间
2016-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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