MicroRNA-7在CD4+T细胞体外活化中的表达及意义

Significance and expression of miR-7 in activated CD4+T cells

二维码有效期 120s

摘要目的：：观察microRNA-7(miR-7)在体外活化CD4+T细胞中表达的变化,初步探讨其意义。方法：采用免疫磁珠分选法(MACS)获得FVB小鼠脾脏中CD4+CD62L+T细胞,经抗CD3/CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测miR-7表达水平,FACS检测活化膜分子CD69的表达变化；进一步观察刺激不同时间点CD4+T细胞中miR-7表达的变化；观察ERK抑制剂PD98059处理后,CD4+ T细胞活化下miR-7表达的变化,同时CCK8法检测细胞增殖变化,FACS检测CD69和CD62L分子的表达变化；最后, Real-time PCR检测各组细胞中 IL-6、IL-10和 IFN-γ等细胞因子表达水平变化。结果：与对照组相比,抗CD3/CD28抗体刺激后,CD4+CD62L+T细胞中miR-7表达水平显著上调,CD69分子的表达明显增加(P<0.05)；与刺激0 h组和24 h组相比,48 h组和72 h组miR-7的表达水平显著上调(P<0.05)；PD98059处理组中,CD4+T细胞的miR-7表达水平显著下降(P<0.05),同时,活化膜分子CD69的表达比例明显降低(P<0.05)；最后,细胞表达IL-6、IL-10和IFN-γ的水平均显著减弱(P<0.05)。结论：miR-7在活化的CD4+T细胞中明显上调,并与ERK信号相关,为后续探讨miR-7在CD4+T细胞功能中的作用提供了前期实验基础。