表达结核分枝杆菌ESAT-6-Ag85A基因的侵入型乳酸菌免疫特性研究
Immune characteristics of invasive lactic acid bacteria expressing Mycobacteria tuberculosis ESAT-6-Ag85A gene
摘要目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响.方法:将真核表达载体pValac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸菌pValac-ES85A/409和pValac-ES85A/FnBPA.将其免疫BALB/c小鼠,检测表达ES85A的侵入型乳酸菌对小鼠树突状细胞(DCs)亚群CD80和CD83的影响以及血清中细胞因子的表达水平.结果:Western blot和免疫荧光证明ES85A蛋白成功表达;与空载体组相比,在小鼠免疫表达ES85A的侵入型乳酸菌后,小鼠脾细胞中CD11+CD80+(P<0.001)和CD11+CD83+(P<0.01)以及血清中细胞因子IL-4(P<0.05)的表达都有所增加.结论:表达ES85A的侵入型乳酸菌能促进小鼠体内DCs的分化和成熟以及提高血清中细胞因子IL-4的表达,为后期研制抗结核分枝杆菌的DNA疫苗制剂奠定了基础.
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