miR-144-3p靶向EGFR对肺癌细胞迁移、侵袭和自噬的影响研究
Effect of miR-144-3p on cell migration,invasion and autophagy in lung cancer cells by targeting EGFR
摘要目的:研究miR-144-3p对肺癌细胞A549迁移、侵袭及自噬的影响,并探讨其机制.方法:运用qRT-PCR检测细胞中miR-144-3p、EGFR的mRNA表达;将miR-144-3p组(转染miR-144-3p mimics)、miR-NC组(转染miR-control)、si-NC组(转染si-control)、siEGFR组(转染siEGFR)、miR-144-3p+pcDNA 3.1组(miR-144-3p mimics和pcDNA 3.1共转染)、miR-144-3p+EGFR组(miR-144-3p mimics和pcDNA 3.1-EGFR共转染),均用脂质体法转染至A549细胞;Western blot检测各组细胞中EGFR、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin1的蛋白表达;Transwell检测各组细胞的迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性.结果:与人正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,人肺腺癌细胞A549中miR-144-3p表达显著降低,EGFR表达显著升高(P<0.05);过表达miR-144-3p、敲减EGFR均可显著抑制A549细胞迁移、侵袭,显著升高LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1的蛋白表达(P<0.05);EGFR是miR-144-3p的靶标.过表达EGFR可逆转miR-144-3p对A549细胞迁移、侵袭的抑制及自噬的促进作用.结论:miR-144-3p可抑制肺癌细胞迁移、侵袭并促进自噬,其机制可能与靶向负调控EGFR有关,将为肺癌的治疗提供新靶点.
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