1-芘丁酸单克隆抗体的制备及免疫学性能鉴定
Preparation and immunological characteristics identification of monoclonal antibody to 1-Pyrenebutyric acid
摘要目的:拟制备灵敏、特异的1-芘丁酸(PBA)单克隆抗体并对其免疫学性能进行鉴定.方法:碳二亚胺法(EDC)制备人工抗原PBA-BSA和PBA-OVA.PBA-BSA免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高、灵敏度良好的小鼠进行细胞融合并筛选出分泌抗PBA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法批量制备抗体并对其免疫学性能进行鉴定.结果:筛选出能稳定分泌PBA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株10C2A6,单克隆抗体效价为1:2.56×105,IC50为0.86 ng/ml,亚型为IgG2b型,亲和常数为1.96×109 L/mol,与芘、1-芘甲醛和1-芘甲醇的交叉反应率分别为1.74%、1.42%和0.63%,与其他物质交叉反应率均小于0.05%.结论:本实验成功制备出了灵敏、特异的PBA单克隆抗体,并为其免疫学检测方法的建立奠定了基础.
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