换一批多态性BoLA Ⅰα1α2与恒定链结合及在真核细胞共定位
Polymorphic BolA Ⅰα1α2 binds to constant chains and co-locates in eukaryotic cells
摘要目的:探明牛主要组织相容性复合体(BoLA)Ⅰ类分子α链的多态性和结合恒定链(Ii)的结构域.方法:从3头淮北黄牛获得75条BoLA Ⅰα基因序列,应用分子生物学软件进行比对分析;克隆典型BoLA Ⅰα结构域和Ii基因插入原核表达质粒,诱导蛋白表达后进行纯化鉴定,用拉下法和免疫印迹检测BoLA Iα链与Ii结合的结构域.构建相应真核重组质粒,应用激光共聚焦显微镜观察其BoLA Ⅰα片段与Ii在细胞内共定位.结果:首先,所克隆的BoLA Ⅰα基因序列存在至少5种基因型,呈现高度多态性,分布于该分子的抗原肽结合区域(α1α2)和胞浆区.其次,构建的含BoLA Ⅰα1α2α3、BoLA Ⅰα1α2和BoLA Ⅰα3基因的原核重组质粒经诱导表达和蛋白纯化,其中,BoLA Ⅰα1α2α3、BoLA Ⅰα1α2具有结合Ii的活性功能.最后,在293T细胞内BoLA Ⅰα1α2α3和BoLA Ⅰα1α2与Ii共定位,而单一BoLA Ⅰα3却不能.结论:BoLA Ⅰα基因具有高度多态性,BoLA Ⅰα1α2是与Ii结合和胞内共定位的功能片段.
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分类号
S852.4
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-484X.2024.01.009
发布时间
2024-01-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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