流式细胞术分析小鼠骨髓移植后肥大细胞和嗜碱性粒细胞重建及细胞来源
Analysis of reconstitution and origin of mast cells and basophils after bone marrow transplantation with flow cytometry
摘要目的:探讨小鼠接受骨髓移植8周后肥大细胞和嗜碱性粒细胞的重建,并确定其分化来源.方法:向接受致死照射剂量的C57BL/6受体小鼠(CD45.2)尾静脉注射同种同基因小鼠(CD45.1)全骨髓单个核细胞(wBMMNC)5×106个.移植后第8周取对照组(未经照射的CD45.2小鼠)和移植组小鼠外周血、腹腔灌洗液、脾脏和骨髓细胞,制备细胞悬液并裂解红细胞,计数有核细胞总数,并利用流式抗体进行染色,分析不同组织中肥大细胞及嗜碱性粒细胞的比例和细胞数,并通过对细胞中CD45.1和CD45.2的占比情况分析其供受体分化来源.结果:小鼠骨髓移植8周后,腹膜腔中肥大细胞比例和骨髓中嗜碱性粒细胞比例均恢复正常,与对照组无显著差异;外周血和脾脏中嗜碱性粒细胞比例也有所恢复,与对照组有显著差异(P<0.05).腹膜腔肥大细胞中CD45.2阳性细胞占比约为93.4%,外周血、脾脏以及骨髓细胞嗜碱性粒细胞中CD45.1阳性细胞占比分别为87.6%、96.4%、90.8%.结论:小鼠经骨髓移植8周后,腹膜腔中肥大细胞和骨髓中嗜碱性粒细胞重建较快,外周血和脾脏中嗜碱性粒细胞重建相对较慢.同时,肥大细胞分化来源于宿主自体驻留细胞,而嗜碱性粒细胞分化则来源于供体骨髓细胞.
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