粉防己碱调节cGAS-STING信号通路对黑色素瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响
Influences of tetrandrine on proliferation,apoptosis and immune escape of melanoma cells by regulating cGAS-STING signal pathway
摘要目的:探讨粉防己碱(Tet)调节环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对黑色素瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响.方法:将MV3细胞分为NC组、Tet-L组(5 μmol/L)、Tet-M组(10 μmol/L)、Tet-H组(15 μmol/L)、RU.521(cGAS抑制剂)组(1 μmol/L)、Tet-H+RU.521组(15 μmol/L+1 μmol/L),CCK-8和平板克隆实验检测MV3细胞增殖;流式细胞术检测MV3细胞凋亡;Western blot检测MV3细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TGF-β、cGAS、STING蛋白表达.Transwell小室将各组细胞分别与NK细胞共培养48 h,并命名为NC共培养组、Tet-L共培养组、Tet-M共培养组、Tet-H共培养组、RU.521共培养组、Tet-H+RU.521共培养组,ELISA检测共培养细胞上清中IFN-γ、粒酶B(Granzyme B)水平;检测NK细胞杀伤活性变化.结果:与NC组比较,Tet-L组、Tet-M组、Tet-H组MV3细胞A450、克隆形成率、PCNA、TGF-β蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax、cGAS、STING蛋白表达升高,且呈剂量依赖性,RU.521组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);与NC共培养组比较,Tet-L共培养组、Tet-M共培养组、Tet-H共培养组细胞上清中IFN-γ、Granzyme B水平、NK细胞杀伤活性升高,且呈剂量依赖性,RU.521共培养组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);RU.521减弱了高剂量Tet对MV3细胞增殖、免疫逃逸的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用.结论:Tet可能通过激活cGAS-STING信号通路抑制黑色素瘤细胞增殖、免疫逃逸,促进细胞凋亡.
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