兔抗人源KHSRP-Acetyl-K205多克隆抗体制备、鉴定及临床意义
Generation,identification and clinical significance of rabbit polyclonal anti-body against human KHSRP-Acetyl-K205
摘要目的:制备人源KHSRP位点特异性乙酰化修饰的兔多克隆抗体,探讨其在肿瘤样本检测中的潜在价值和临床意义.方法:设计并合成KHSRP蛋白Lys205(K205)乙酰化的氨基酸修饰肽段,在肽段羧基末端偶联网络匙孔血蓝蛋白(KLH),形成抗原-载体偶联物.5次抗原免疫新西兰大白兔后采血分离血清,间接ELISA测定血清抗体效价,亲和层析法纯化特异性多克隆抗体,Western blot及免疫组化(IHC)检测抗体特异性.结果:终兔血清抗体的ELISA效价>5.12×105,能够用于Western blot和IHC特异性检测K205乙酰化的KHSRP蛋白.结论:KHSRP在肿瘤中的作用可能与其表面乙酰化修饰密切相关,本研究成功制备了抗人源KHSRP乙酰化兔多克隆抗体,为评估肿瘤细胞KHSRP乙酰化水平与肿瘤发生发展的生物关联奠定基础.
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