血根碱调节MLCK-MLC信号通路对脓毒症大鼠肠上皮屏障的保护作用
Protective effect of sanguinarine on intestinal epithelial barrier in septic rats through modulation of MLCK-MLC signaling pathway
摘要目的:探讨血根碱(SAG)对脓毒症大鼠肠上皮屏障的影响,并初步探讨潜在机制.方法:根据随机数字表法将大鼠分为对照组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、低剂量SAG组(L-SAG组)、中剂量SAG组(M-SAG组)和高剂量SAG组(H-SAG组),每组10只.采用盲肠结扎穿刺法(CLP)诱导脓毒症大鼠模型.采用HE染色观察肠上皮病理损伤;采用二胺氧化酶(DAO)试剂盒检测血清DAO活性;采用高效液相色谱法检测尿乳糖/甘露醇(L/M)值;采用ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平;采用Western blot检测肠上皮组织中蛋白表达水平.结果:Sham组大鼠肠黏膜完整、肠绒毛排列整齐;CLP组肠黏膜呈现出充血和水肿、炎症细胞浸润、肠绒毛排列不规则、绒毛间隙扩大;M-SAG组和H-SAG组的肠黏膜病理损伤较CLP组有不同程度减轻.与Sham组相比,CLP组Chiu's评分、血清DAO活性和尿L/M值均明显升高;与CLP组相比,M-SAG组和H-SAG组Chiu's评分、血清DAO活性和尿L/M值明显降低(P<0.05).CLP组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均显著高于Sham组,而M-SAG组和H-SAG组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均显著低于CLP组(P<0.05).与Sham组相比,CLP组大鼠肠上皮中Claudin-3、ZO-1和occludin蛋白表达显著降低,而MLCK、MLC和p-MLC蛋白表达均显著增加;与CLP组相比,M-SAG组和H-SAG组大鼠肠上皮中Claudin-3、ZO-1和occludin蛋白表达显著增加,而MLCK、MLC和p-MLC蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论:SAG能够减轻脓毒症大鼠的肠上皮屏障损伤、抑制肠上皮屏障通透性改变、保护肠上皮屏障完整性,其中部分作用通过抑制MLCK-MLC信号通路激活实现.
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