谷氨酰胺强化肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠Treg/Th17平衡的影响及机制
Effect and mechanism of glutamine enhanced enteral nutrition on Treg/Th17 balance in rats with severe acute pancreatitis
摘要目的:探究谷氨酰胺(Gln)强化肠内营养对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)平衡的影响及机制.方法:80只大鼠随机分为假手术组(Sham)、SAP组、肠内营养组(EN)、Gln联合肠内营养组(Gln+EN),每组20只.采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠构建SAP大鼠模型;造模4 h后,各组采用鼻空肠置管法进行营养治疗,EN组、Gln+EN组分别给予肠内营养液、添加Gln的肠内营养液;Sham组、SAP组给予等体积0.9%氯化钠溶液.48 h后,HE染色检测胰腺组织病理损伤;ELISA检测血清淀粉酶、脂肪酶、IL-6、TNF-α、IL-10、IL-17水平;流式细胞术检测脾脏和胰腺Th17、Treg细胞比例;RT-qPCR检测脾脏Foxp3、CTLA-4、GITR、RORγt、IL-17A mRNA水平;免疫组化染色、免疫荧光染色、Western blot检测胰腺髓过氧化物酶(MPO)、CD68、IL-6、TNF-α、IL-10、IL-17水平.结果:Sham组大鼠胰腺结构正常,无出血及坏死;SAP组胰腺结构破坏,有明显出血、坏死及炎症浸润;EN组和Gln+EN组胰腺仅存在少量出血、坏死及炎症浸润.与Sham组相比,SAP组胰腺组织学评分、血清淀粉酶、脂肪酶水平升高,胰腺MPO+中性粒细胞和CD68+巨噬细胞增多,血清和胰腺IL-6、TNF-α、IL-17水平升高,IL-10水平降低,Th17细胞百分比、RORγt、IL-17A mRNA水平升高,Treg细胞百分比、Treg/Th17、Foxp3、CTLA-4、GITR mRNA水平降低(均P<0.05);与SAP组相比,EN组和Gln+EN组胰腺组织学评分、血清淀粉酶、脂肪酶水平降低,胰腺MPO+中性粒细胞和CD68+巨噬细胞减少,血清和胰腺IL-6、TNF-α、IL-17水平降低,IL-10水平升高,Th17细胞百分比、RORγt、IL-17A mRNA水平降低,Treg细胞百分比、Treg/Th17、Foxp3、CTLA-4、GITR mRNA水平升高(均P<0.05);且Gln+EN对SAP的治疗作用优于EN(均P<0.05).结论:Gln强化肠内营养能够调控SAP大鼠Treg/Th17平衡,降低机体全身炎症反应.
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