基于Keap1-Nrf2-ARE通路探讨补肺益阳化痰方对烟草烟雾诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤的影响
Exploring effect of Bufei Yiyang Huatan Formula on cigarette smoke induced oxidative stress damage of human bronchial epithelial cells based on Keap1-Nrf2-ARE pathway
摘要目的:探讨补肺益阳化痰方对烟草烟雾(CS)诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤及Keap1-Nrf2-ARE通路的影响.方法:构建CS诱导的人支气管上皮细胞以及补肺益阳化痰方含药血清,将细胞分为对照组(Control组)、模型组(CS组)、CS+补肺益阳化痰方含药血清低、中、高剂量组(CS+BFYYHTF-L、CS+BFYYHTF-M、CS+BFYYHTF-H组)、CS+补肺益阳化痰方含药血清高+Nrf2抑制剂组(CS+BFYYHTF-H+ML385组);CCK-8检测细胞活性;DCFH-DA探针检测ROS含量;ELISA检测上清炎症因子及氧化应激水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞凋亡及Keap1-Nrf2-ARE通路相关蛋白表达.结果:CS组较Control组ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及细胞凋亡率、C-caspase3、C-caspase9、Keap1表达升高,SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05);CS+BFYYHTF-L、CS+BFYYHTF-M、CS+BFYYHTF-H组较CS组ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及细胞凋亡率、C-caspase3、C-caspase9、Keap1表达降低,SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1表达升高(P<0.05);CS+BFYYHTF-H+ML385组较CS+BFYYHTF-H组ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及细胞凋亡率、C-caspase3、C-caspase9、Keap1表达升高,SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05).结论:补肺益阳化痰方可改善CS诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤,与抑制Keap1-Nrf2-ARE通路相关.
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