CircVMA21调节miR-122-5p/NFⅨ轴对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响
Effect of CircVMA21 on lipopolysaccharide-induced alveolar epithelial cell injury by regulating miR-122-5p/NFⅨ axis
摘要目的:探究环状RNA VMA21(CircVMA21)调节微小RNA-122-5p(miR-122-5p)/核因子Ⅸ(NFⅨ)轴对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响.方法:用1 μg/ml LPS处理A549细胞,将LPS处理的A549细胞分为LPS组、pcDNA-NC组(pcDNA-NC)、pcDNA-VMA21组(转染pcDNA-VMA21)、pcDNA-VMA21+miR-NC组(转染pcDNA-VMA21+miR-NC)、pcDNA-VMA21+miR-122-5p mimics组(转染pcDNA-VMA21+miR-122-5p mimics),另取未做任何处理的A549细胞记为NC组.qRT-PCR检测各组A549细胞中CircVMA21、miR-122-5p表达;CCK-8检测A549细胞活力;流式细胞术检测A549细胞凋亡情况;ELISA检测A549细胞TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测NFⅨ、B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、BCL2 相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)及上皮间质转化相关蛋白.结果:与NC组相比,LPS组CircVMA21、NFⅨ水平、A450、E-cadherin、Bcl-2水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、miR-122-5p水平、Bax、cleaved-Caspase-3、N-cadherin、Vimentin蛋白水平、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05);与LPS组、pcDNA-NC相比,pcDNA-VMA21组CircVMA21、NFⅨ水平、A450、E-cadherin、Bcl-2水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6含量、miR-122-5p水平、Bax、cleaved-Caspase-3、N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05);过表达miR-122-5p逆转了CircVMA21表达上调对LPS诱导的A549细胞损伤的改善效果;CircVMA21靶向调节miR-122-5p/NFⅨ轴.结论:CircVMA21可能通过下调miR-122-5p以及上调NFⅨ来改善LPS诱导的A549细胞损伤.
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