参七虫草方靶向MAPK/ERK/Nrf2信号通路调控肺泡巨噬细胞的作用机制研究
Study on mechanism of Shenqi Chongcao formula targeting MAPK/ERK/Nrf2 signaling pathway to regulate alveolar macrophages
摘要目的:探究参七虫草方对肺纤维化中肺泡巨噬细胞的调控作用及机制.方法:取SPF级雄性SD大鼠60只,体外培养大鼠肺纤维化巨噬细胞,制备含药血清,CCK-8法筛选参七虫草方最佳给药时间及血清浓度,将培养的巨噬细胞分为空白组、模型组、参七虫草最佳含药血清组、Nrf2抑制剂组,除空白组外,均采用一次性气管内滴注博来霉素制备特发性肺纤维化(IPF)模型.CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测各组巨噬细胞M1、M2表型偏移;RT-qPCR检测各组Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达;Western blot检测各组p-MAPK、p-ERK、活化蛋白酶-1(AP-1)蛋白水平.结果:10%含药血清在干预24 h情况下改善巨噬细胞活力最为显著(P<0.05);与模型组相比,参七虫草组抑制细胞活力最明显(P<0.05);相较于空白组,模型组M1型巨噬细胞比例、M1/M2明显升高(P<0.01);相较于模型组,药物干预的两组M2型巨噬细胞比例明显升高(P<0.05),而M1/M2明显降低(P<0.05);与模型组相比,参七虫草组Nrf2、HO-1 mRNA表达显著上调(P<0.05),AP-1、p-ERK、p-MAPK蛋白水平显著下调(P<0.05).结论:参七虫草方可靶向激活巨噬细胞MAPK/ERK/Nrf2通路,并调控巨噬细胞极化,为参七虫草方治疗肺纤维化的临床应用提供了理论支持.
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