换一批蒙药那仁满都拉联合BMSCs治疗对大鼠骨折愈合过程的机制研究
Mechanism of Mongolian medicine Na Ren Mandula combined with BMSCs treatment in process of fracture healing in rats
摘要目的:探究蒙药那仁满都拉联合BMSCs对大鼠骨折愈合过程的机制.方法:制备大鼠桡骨骨折模型,按照随机数字表法依次分为空白组、模型组、蒙药那仁满都拉联合BMSCs组、BMSCs组和蒙药那仁满都拉组,每组20只,其中空白组为正常大鼠,蒙药那仁满都拉联合BMSCs组在桡骨骨折部位皮下注射2 μg/kg经蒙药那仁满都拉处理的BMSCs,BMSCs组皮下注射2 μg/kg BMSCs,蒙药那仁满都拉组皮下注射2 μg/kg蒙药那仁满都拉,模型组和空白组则给予等剂量无菌生理盐水,每日皮下注射2次,连续治疗14 d.X射线、HE染色观察骨折愈合情况,ELISA检测各组大鼠血清中TNF-α和IL-6含量,Western blot、qRT-PCR检测ERK/MAPK信号通路相关分子和BMP-2、BMP-9、VEGF表达情况.结果:X射线拍摄结果显示,与空白组相比,蒙药那仁满都拉联合BMSCs组第2周骨折愈合程度相近,Lane-Sandhu评分差异无统计学意义(P>0.05),模型组、BMSCs组和蒙药那仁满都拉组骨折愈合缓慢,但BMSCs组和蒙药那仁满都拉组Lane-Sandhu评分高于模型组(P<0.05);HE染色显示,模型组血管内皮细胞数量较少,大量的炎症介质浸润,空白组和蒙药那仁满都拉联合BMSCs组成纤维细胞数量较为丰富,胶原纤维的排列趋于整齐,血管内皮细胞清晰可见,BMSCs组和蒙药那仁满都拉组可见少量炎症介质浸润,二者的组织恢复程度不及蒙药那仁满都拉联合BMSCs组;模型组TNF-α、IL-6、p-ERK、p-MAPK、BMP-2、BMP-9、VEGF蛋白和mRNA水平明显高于空白组(P<0.05),蒙药那仁满都拉联合BMSCs组、BMSCs组和蒙药那仁满都拉组TNF-α、IL-6、p-ERK、p-MAPK、BMP-2、BMP-9、VEGF蛋白和mRNA水平明显低于模型组(P<0.05),且蒙药那仁满都拉联合BMSCs组TNF-α、IL-6、p-ERK、p-MAPK、BMP-2、BMP-9、VEGF蛋白和mRNA水平明显低于BMSCs组和蒙药那仁满都拉组(P<0.05).结论:蒙药那仁满都拉联合BMSCs治疗可明显改善骨折愈合,其作用机制可能通过调控ERK/MAPK信号通路实现.
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