胡桃楸水提取物中没食子酸和丁香酸在大鼠血浆中的药代动力学研究
A Pharmacokinetic Study of Gallic Acid and Syringic Acid in The Water Extraction of Juglans mandshurica Maxim. in rat plasma
摘要目的:对大鼠口服胡桃楸水提取物后血浆中没食子酸和丁香酸进行药代动力学研究,初步确定其药代动力学参数.方法:采用HPLC分析方法测定大鼠血浆中没食子酸和丁香酸的浓度.色谱柱:Agilent Poroshell 120 SB-C18(2.1×100 mm,2.7μm),预柱:Agilent Poroshell 120 SB-C18(2.1×5 mm,2.7μm);流动相:0.2%甲酸水(v/v,A)-0.2%甲酸乙腈(v/v,B),流速:0.3 mL/min,梯度洗脱条件为:0~3 min,0~5%B;3~5 min,5~10%B;5~13 min,10%B,后运行时间为3 min,柱温为30℃.单次灌胃给予大鼠胡桃楸水提取物(以生药量计9.6 g/mL),灌胃剂量为1 mL/100 g,于给药前和给药后5、15、30、45、60、90、120、240、360和480 min分别取血0.2 mL,将血浆采用甲醇蛋白沉淀法处理后,取10μL供HPLC分析.应用3P97软件处理数据,计算其药代动力学参数.结果:没食子酸在0.04~5μg/mL范围内线性良好,最小检测限(LOQ)为0.006μg/mL,最小定量限(LOD)为0.04μg/mL;日内和日间精密度(RSD)分别为1.8% ~11.0%和3.5% ~9.4%,准确度(RE)分别为-0.7% ~1.3%和-0.5% ~2.1%;血浆提取回收率为81.2% ~94.4%;药代动力学参数为Cmax=(0.64±0.05)μg/mL,Tmax=(61.80±8.03)min,T1/2=(184.21±12.73)min,AUC0-t=(96.37±10.33)μg·min/mL,AUC0-∞=(121.59±8.87)μg·min/mL.丁香酸在0.04~5μg/mL范围内线性良好,最小检测限(LOQ)为0.008μg/mL,最小定量限(LOD)为0.04μg/mL;日内和日间精密度(RSD)分别为4.0% ~6.9%和2.1% ~8.8%,准确度(RE)分别为-1.2% ~4.9%和-4.8% ~0.8%;血浆提取回收率为84.9% ~93.6%;药代动力学参数为Cmax=(0.43±0.04)μg/mL,Tmax=(30.67±0.92)min,T1/2=(99.63±5.96)min,AUC0-t=(40.33±2.42)μg·min/mL,AUC0-∞=(47.02±3.29)μg·min/mL.结论:研究建立大鼠血浆中没食子酸和丁香酸浓度的高效液相色谱分析方法,经过方法学验证,该方法灵敏度高、 重现性好、 专属性强,符合生物样品分析的要求,并成功应用于大鼠血浆中没食子酸和丁香酸的分析.
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