LncRNASNHG14靶向miR-449a/CCNE2对前列腺癌细胞生物行为学的影响
Effects of LncRNA SNHG14 on the biological behaviors of prostate cancer cells by targeting miR-449a/CCNE2
摘要目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)核内小RNA宿主基因14(SNHG14)靶向微小RNA-449a(miR-449a)/细胞周期蛋白E2(CCNE2)对前列腺癌(PCa)细胞生物行为学的影响.方法 用qRT-PCR法检测前列腺组织及癌细胞中LncRNASNHG14、miR-449a、CCNE2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNASNHG14与miR-449a及CCNE2 与 miR-449a 的靶向关系;将 DU145 细胞分为 Control 组、si-NC、si-SNHG14、si-SNHG14+anti-NC、si-SNHG14+anti-miR-449a,除Control组外,其余各组转染相应质粒;用Edu实验检测DU145细胞增殖;用流式细胞仪检测DU145细胞凋亡;用划痕愈合实验检测DU145细胞迁移;用Transwell实验检测DU145细胞侵袭;用Western blot检测Ki67、Cyclin D1、Bax、caspase-3、CCNE2蛋白表达;用裸小鼠移植瘤检测LncRNA SNHG14对前列腺移植瘤生长以及对miR-449a/CCNE2的影响.结果 在PCa组织及细胞中LncRNA SNHG14、CCNE2呈高表达,miR-449a呈低表达(P<0.05);生物信息学、双荧光素酶分析显示LncRNA SNHG14与miR-449a及CCNE2与miR-449a存在靶向结合位点;与si-NC组相比,si-SNHG14组细胞LncRNASNHG14、CCNE2、Edu阳性率、Cyclin D1、Ki67表达水平、划痕愈合率、侵袭细胞数目降低,miR-449a、细胞凋亡率、Bax、caspase-3表达水平升高(P<0.05);与si-SNHG14+anti-NC组相比,si-SNHG14+anti-miR-449a 组 miR-449a、细胞凋亡率、Bax、caspase-3 表达水平降低,CCNE2、Edu 阳性率、Cyclin D1、Ki67表达水平、划痕愈合率、侵袭细胞数目升高.裸小鼠移植瘤实验结果显示,si-SNHG14组裸小鼠移植瘤体积、质量比si-NC 组更小,LncRNASNHG14、CCNE2表达量下降,miR-449a表达量上升(P<0.05).结论 在PCa细胞中下调Ln-cRNA SNHG14可通过调节miR-449a/CCNE2信号通路,抑制癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进癌细胞凋亡.
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