换一批重组水貂生长激素真核表达载体的构建及在巴斯德毕赤酵母中的表达
Construction of Eukaryotic Expression Vector of Mustela Vision Growth Hormone and Expression in Yeast Pichia Pastoris
摘要[目的]构建水貂生长激素(mGH)基因真核表达载体,并在巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达,为大量获得水貂生长激素奠定基础.[方法]将体外合成的水貂生长激素基因插入分泌型表达载体pPIC9K.将重组的pPIC9K-mGH用Sac I酶切后,LiCl法转化巴斯德毕赤酵母菌株GSll5,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blot检测酵母上清中水貂生长激素的表达.[结果]酵母上清中可见与目的蛋白相对分子量(31kd)相符的条带,该条带可被水貂生长激素多克隆抗体特异识别.[结论]正确构建了水貂生长激素真核表达载体,该蛋白能在巴斯德毕赤酵母中成功表达.
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