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猪中性粒细胞磷酸二酯酶基因表达及活性研究

Study on Activity and Gene Expression of Phosphodiesterase in Porcine Neutrophils

摘要[目的]通过对猪中性粒细胞磷酸二酯酶(PDE)基因表达、活性及特异性抑制剂实验检测,研究其存在的主要PDE亚型及在体外的活性,为探讨PDE在中性粒细胞的分布、活性变化及对cAMP、cGMP调节与中性粒细胞功能关系提供依据.[方法]采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PDE基因在猪中性粒细胞的表达,以高效液相色谱(HPLC)检测环核苷酸在PDE反应前后的含量变化,计算PDE活性.[结果]在检测的18个PDE亚型中,PDE1B、2A、3A、3B、4A、4B、4C、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、11A 共15个PDE mRNA在猪中性粒细胞表达,特异性抑制剂实验表明PDE4、PDE5分别为水解cAMP、cGMP的主要PDE亚型;cAMP/cGMP-PDE在10~40 μ1范围内,与其活性存在良好的线性关系(r=0.9929/0.9992).[结论]猪中性粒细胞至少存在15个PDE亚型,其中PDE4、PDE5为主要存在的2个亚型,PDE样品量在一定范围内与其活性存在良好的线性关系,可作为筛选PDE型中性粒细胞功能调节剂的方法.

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作者 姜代勋 陈武 谷金妮 许剑琴 于同泉 路苹 穆祥 学术成果认领
分类号 S8
DOI 10.3321/j.issn:0578-1752.2007.06.025
发布时间 2007-07-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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