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化学去核卵母细胞为受体的小鼠体细胞核移植

Reconstruction of Mouse Embryos with Chemically Enucleated Oocytes

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摘要[目的]本研究旨在探索一种崭新的、化学试剂诱导去核卵母细胞为核受体的、无透明带的、手工体细胞核移植方法.[方法]将第一次减数分裂期小鼠卵母细胞进行诱导去核并去除透明带,去核卵胞质与胎儿成纤维细胞粘合、电融合和SrC12激活后,体外培养重构胚.[结果]重构胚融合率和激活率分别为84.8%和93.6%;胚胎2-细胞发育率为24.7%,4-细胞率为6.74%;2-细胞期克隆胚移植假孕受体后,没有获得怀孕受体;分别以"血清饥饿"胎儿成纤维细胞、新鲜细胞和冷冻保存细胞为供体作核移植,结果表明,冷冻保存细胞的融合率(69.3%)与其余两组(80.6%和84.8%)呈显著差异(P＜0.05);激活率、2-细胞和4-细胞发育率,则3组间差异不显著(P＞0.05).[结论]本文将小鼠卵母细胞的化学去核与无透明带技术相结合,获得的克隆胚目前已发育到4-细胞期;另外,供体细胞的3种准备方式均不影响胚胎发育率.该方法属手工克隆,它的成功将会大大简化核移植程序,提高核移植总效率.