换一批
换一批一株产α-淀粉酶菌株的分离筛选、鉴定及酶学性质研究
Screening and identification of an α-amylase-producing strain and its enzymatic property
摘要为了更加经济、更高产量的分离出高纯酶,该实验从富含淀粉的土壤中筛选出1株高产淀粉酶的菌株LZ-10,通过菌落形态观察、生理生化特性实验、16S rDNA序列和gyrB基因序列分析对其进行鉴定.采用硫酸铵盐析,DEAE-52阴离子交换纤维素纯化,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测蛋白分子质量.结果表明,菌株LZ-10鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).纯化后的淀粉酶比活力为59.91 U/mg,纯化倍数为4.53,回收率为60.5％,分子质量为55.4 kDa.对其酶学性质进行研究,得出菌株LZ-10所产淀粉酶最大酶活力为41.6 U/mL,最适作用温度为50℃,在50～70℃温度环境下其稳定性较高;最适pH值为7.0,在pH=5.0～7.0的环境条件下稳定性较高;Ca2+、Mg2+、Na+、K+对淀粉酶有激活作用;乙二胺四乙酸(EDTA)、Fe2+、Zn2+对淀粉酶有抑制作用.
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