换一批
换一批产酸克雷伯氏菌乳酸脱氢酶基因敲除提高2,3-丁二醇产量
Knockout of lactate dehydrogenase gene in Klebsiella oxytoca to enhance 2,3-butanediol production
摘要乳酸脱氢酶(LDH)是乳酸生成途径中的关键酶,敲除乳酸脱氢酶基因,理论上可以减少甚至消除乳酸的产生,提高2,3-丁二醇的产量和得率.该研究采用体外拼接方式构建乳酸脱氢酶基因的同源线性片段ldhL-Cm'-ldhR,将其电转化至Klebisella oxytoca HD79中,通过Red同源重组技术筛选敲除成功的重组菌株,经聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)及2,3-丁二醇产量检测验证.结果表明,重组菌株2,3-丁二醇产量为40.20g/L、转化率为0.38 g/g和生产强度为0.48 g/(L·h),相比供试菌株分别提高了26.8％、11.8％和45.5％;而乳酸产量则由4.83g/L下降至2.45g/L,相比供试菌株降低了49.3％.该实验为后续进一步提高2,3-丁二醇的产量和扩大菌株选择范围奠定基础.
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分类号
TQ923
栏目名称
DOI
10.11882/j.issn.0254-5071.2020.11.030
发布时间
2021-03-03
基金项目
国家自然科学基金项目（31570492）；
黑龙江省教育厅重点项目（HDJCCX-2016Z05）；
广西自然科学基金（2017GXNSFAA198101）；
广西高校中青年教师基础能力提升项目（2019KY0580,2020KY13007）
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