摘要目的 探索中药制剂蜈蚣败毒饮通过干预自噬相关途径脑Ras同源蛋白(ras homolog enriched in brain,Rheb)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)进而影响皮肤组织中组织驻留记忆T细胞(tissue-resident memory T cells,TRM)的表达和分泌来改善银屑病复发的机制.方法 采用咪喹莫特二次诱导法制备30只复发型银屑病小鼠模型,将其分为6组,每组5只,分别为空白组、模型组、甲氨蝶呤组(3.6 ×10-4g/kg)及蜈蚣败毒饮低、中、高剂量组(7.93、15.85、31.7 g/kg).记录造模过程中小鼠皮损变化,并观测灌胃后鼠银屑病面积和严重程度指数(mice psoriasis area and severity index,MPASI)评分;采用马松三色染色(masson staining,Masson)和天狼星红染色法观察小鼠皮损真皮层中胶原纤维的状态;采用蛋白印迹(western blot,WB)实验及免疫组织化学染色检测小鼠皮损组织中Rheb、mTOR蛋白及磷酸化(phosphorylated,p)-Rheb、p-mTOR蛋白的表达及分布情况;采用流式细胞术检测小鼠皮损组织中TRM细胞的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠血清中TRM细胞主要分泌因子白细胞介素(interleukin,IL)-17、IL-22、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的含量.结果 咪喹莫特二次诱导时银屑病样皮损出现时间显著早于一次诱导(2 d＜4 d),且复发型银屑病模型的皮损表现更为严重.与空白组比较,模型组的MPASI分值明显增高[(26.40±2.55)分vs.(0.00±0.00)分],皮损组织中大量胶原纤维溶解,肌纤维排列混乱,炎细胞浸润明显,其皮损中的p-Rheb、Rheb、p-mTOR、mTOR蛋白均受到不同程度的抑制,自噬反应的发生导致皮损中TRM细胞表达呈现活跃状态[(392.60±35.62)个vs.(25.40±3.56)个],分泌大量的 IL-17[(493.27±35.53)pg/mL]、IL-22[(407.87±24.53)pg/mL]、IFN-γ[(242.38±13.29)pg/mL]导致银屑病复发且皮损加重.与模型组比较,蜈蚣败毒饮低、中、高各剂量组均可以显著降低皮损的MPASI分值[(12.40±1.23)分、(9.20±1.37)分、(5.20±0.44)分 vs.(22.60±1.59)分,P＜0.01],蜈蚣败毒饮中、高剂量组可以显著促进真皮组织内胶原纤维的合成,调控胶原纤维和肌纤维排列,抑制炎细胞浸润,并能够显著解除皮损中p-Rheb、p-mTOR蛋白的抑制状态(P＜0.01),从而抑制自噬反应的发生,并进一步降低皮损中TRM细胞的表达[(168.40±20.21)个、(156.20±16.46)个]和炎症因子IL-17[(295.58±27.62)pg/mL、(276.36±22.47)pg/mL]、IL-22[(191.07±20.33)pg/mL、(187.66±18.25)pg/mL]、IFN-γ[(124.49±10.07)pg/mL、(120.42±9.53)pg/mL]的分泌(P＜0.01).结论 蜈蚣败毒饮可能通过调控Rheb/mTOR途径,抑制自噬反应的发生,从而阻断了自噬反应对于TRM的能量供给,通过影响TRM细胞的活性而降低银屑病的复发.