梗阻性黄疸大鼠肠黏膜上皮紧密连接蛋白和MLCK的研究
The study on tight junction proteins and myosin light chain kinase in obstructive jaundice in rats
摘要目的 探讨梗阻性黄疸肠黏膜屏障破坏的机制.方法 建立梗阻性黄疸大鼠的动物模型,分别于胆管结扎10 d和20 d后,采用免疫组化、Western blot方法检测末端回肠黏膜的紧密连接蛋白成员ZO-1和Occludin与肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的分布和表达.结果 正常回肠黏膜层ZO-1和Occludin的分布相似,主要位于上皮细胞的边缘,细胞膜顶端,沿绒毛下方均匀连续分布;MLCK主要分布在细胞浆内.梗阻性黄疸时ZO-1和Occludin分布不均, 染色变淡,线条模糊,边缘粗糙有毛刺状突起;MLCK分布散乱,染色稀疏.与对照组相比20 d组和10 d组的ZO-1,Occludin,MLCK数量明显减少,强阳性表达率分别从70.0 %,80.0 %,70.0 %降至10 d组的28.6 %,28.6 %,28.6 % (均P<0.05)和20 d组的ZO-1从10 d 组的28.6 %降至14.3 %, 35.7 %, 21.4 % (均P<0.05).20 d 组的ZO-1下降较10 d组更为明显(P<0.05), 而Occludin和MLCK变化不明显.Western blot检测的结果与之相似.结论 梗阻性黄疸时大鼠小肠黏膜上皮ZO-1,Occludin,MLCK分布紊乱,表达下降,小肠黏膜上皮屏障的完整性破坏.
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