噬菌体随机十二肽库淘选及鉴定胃癌特异性结合肽
Screening and Identification of Specific Binding Polypeptide for Gastric Cancer by A Ph.D-12TM Phage Display Peptide Library
摘要目的 利用噬菌体展示随机十二肽库淘选出与胃癌BGC823细胞特异性结合的多肽,为寻找胃癌早期诊断和治疗的标志物打下基础.方法 以胃癌细胞BGC823为靶细胞,胃黏膜永生化上皮细胞GES为吸附细胞,在常温下对噬菌体随机十二肽库进行三轮消减淘选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体.并经ELISA和免疫组化法初步鉴定噬菌体克隆亲和力;测序阳性克隆,合成荧光素FITC标记多肽,鉴定其与胃癌细胞和胃癌组织的亲和力及特异性.结果 三轮淘选后,经ELISA法初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中11号(GC-11)多肽对BGC823细胞亲和力最高.细胞、组织免疫荧光实验进一步证明,荧光素标记的多肽FITC-GC-11对BGC823细胞和胃癌组织具有高亲和力.结论 利用噬菌体随机十二肽库成功淘选出与胃癌细胞BGC823和胃癌组织具有较高亲和力的多肽GC-11.
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